人操人-91片黄在线观看-在线视频一区二区三区-伊人欧美-91欧美激情一区二区三区成人-正在播放国产精品-国模大尺度视频-浮力影院国产第一页-91手机视频-在线免费观看污-亚洲男人网站-国产99免费视频-久久涩综合-日韩精品一区二区三区视频-黑人黄色大片

服務咨詢熱線:

021-66030766

TECHNICAL ARTICLES

技術文章

當前位置:首頁技術文章基因組DNA提取純化的注意事項

基因組DNA提取純化的注意事項

更新時間:2015-07-01點擊次數:1851


  1. 組織樣本 DNA 純化

大多數動物組織可以用裂解緩沖液和蛋白酶/蛋白酶 K 進行裂解。在加入裂解液之前需要將組織切成小塊,有條件的話建議使用 TissueLyser 或研缽等提前進行均質化。骨骼肌,心臟,皮膚等組織含有收縮蛋白,結締組織和膠原蛋白,所以利用蛋白酶 / 蛋白酶 K 進行充分消化是必須的。

FFPE 樣本進行 DNA 純化時需要預裂解。福爾馬林可由 PBS 洗滌除去,石蠟可由二甲苯和乙醇進行去除。在蛋白酶消化后提高孵育的溫度有助于逆轉交聯,以便更好的從 FFPE 組織中釋放 DNA,從而有助于提高 DNA 產量和改善下游檢測性能。 從 FFPE 中得到的 DNA 通常比從新鮮或凍存樣本中得到的 DNA 分子量小;DNA 降解的程度則取決于樣本類型,儲存時間和固定的條件。


  1. 從微量樣本中純化 DNA

微量樣本中 DNA 的含量很低,通常小于 5 ng DNA, 通常需要使用 carrier RNA 來提高產量(不會影響下游分析檢測)。如果需要使用 carrier RNA,那么在測量 OD 的時候會因為使用 carrier RNA 造成濃度測量有偏差(因為 RNA 在 260 nm 也有吸收)。

推薦使用 QIAamp DNA Micro Kit 從微量樣本中進行 DNA 純化,該試劑盒采用 MinElute 硅膠膜柱,洗脫體積可以低至 20 μl,同時通過兩步洗滌去除 PCR 抑制劑等污染物,zui大程度從微量樣本中純化 DNA。


  1. 從血液樣本中純化 DNA

血液樣本可以是新鮮或凍存全血或干血片,由于血液樣本在采集后會迅速凝固,所以通常在采血時使用 EDTA,檸檬酸鹽或肝素進行抗凝。經過抗凝處理的血液樣本可以直接用于 DNA 純化,需要注意的是使用的 DNA 純化方法需要能夠去除上述抗凝劑,以免干擾下游 PCR 檢測。全血也可以在 DNA 純化前*行白細胞富集等再進行 DNA 純化。

從血液中純化 DNA 的產量很大程度上取決于血液中的白細胞數量,而白細胞數量則和血液的供體情況有很大關聯(如貧血或感染都會造成白細胞數量變化)。上述情況必須在進行 DNA 純化前就應該考慮到。此外,有些動物有有核血,這意味著這類樣本中含有更多的 DNA,在從此類血樣中純化 DNA,上樣量需要減少 10 倍左右。


從細胞中純化 DNA
  1. 哺乳動物細胞可以使用蛋白酶 K 進行裂解
  2. 酵母細胞需要首先使用溶菌酶對細胞壁進行處理,然后使用蛋白酶或蛋白酶 K 進行消化
  3. 許多細菌細胞可以使用裂解 buffer 和蛋白酶 / 蛋白酶 K 進行裂解,某些細菌如革蘭氏陽性菌需要預先使用溶菌酶對細胞壁進行處理
  4. 細菌細胞需要先從生物體液中沉淀,然后從中純化細菌 DNA,拭子樣本需要先使用殺菌劑進行預處理然后再離心
  5. 使用機械裂解會比用酶消化的效果要好,尤其是針對革蘭氏陽性菌或真菌而言

尊敬的客戶:
    感謝您關注我們的產品,本公司除了有此產品介紹以外,還有三用紫外分析,核酸蛋白檢測儀,凝膠成像分析系統,光化學反應儀,恒流泵,自動部分收集器等等的介紹,您如果對我們的產品有興趣,咨詢。謝謝!

上海嘉鵬科技有限公司 www.shjpkj。。com / www.jp1718。。com
:   36162366 
400免費:4000-123-925  
 
,,,,2880150297

地址:上海市真陳路1398弄15號  :200444 


上一個:你知道蠕動泵種類有那兩種?

返回列表

下一個:RNA提取純化的注意事項

主站蜘蛛池模板: 成人在线一区二区三区 | 天堂二区 | 亚洲色图视频在线观看 | 亚洲理论在线 | 亚洲午夜国产 | free性m.freesex欧美| 国产精品人成在线观看免费 | 中文字幕av一区二区 | 久久精品二区 | 日本a级黄 | 女人和拘做爰正片视频 | 婷婷开心激情网 | 色花堂在线 | 99精品一区二区三区 | 欧美黑人又粗又大又爽免费 | 青青草超碰在线 | 欧美黄色短片 | 狠狠网站| 国产精品视频区 | 亚洲永久免费精品 | 日韩av在线一区二区 | 日本三级视频在线播放 | av手机免费看 | 精品人妻一区二区免费 | 色网站免费观看 | 高h在线观看 | 日本a级黄 | 玉女心经在线看 | 午夜影院在线免费观看 | 日韩黄色免费 | 91人妻一区二区三区蜜臀 | 日日草| 欧美日韩在线看 | 亚洲欧美另类一区 | 亚洲男人的天堂在线视频 | 国产又粗又猛又爽又黄视频 | 日本高清视频在线观看 | 波多野结衣小视频 | 欧美日韩亚洲一区二区 | 最好看的电影2019中文字幕 | 一区二视频 | 日本伦理一区二区 | 大尺度床戏揉捏胸视频 | 欧美午夜精品久久久久久浪潮 | 制服.丝袜.亚洲.中文.综合懂 | 金鱼妻日剧免费观看完整版全集 | 91香蕉国产在线观看软件 | 动漫羞羞 | 天干夜天干天天天爽视频 | 都市豪门艳霸淫美妇 | 激情文学av| 久久久一区二区 | 欧美福利视频在线观看 | 天天夜夜操 | 亚洲另类色综合网站 | 国产在线中文字幕 | 久热最新视频 | 欧美一区二区三区视频在线观看 | 红桃视频91| 狠狠狠| 强开小嫩苞一区二区三区网站 | 欧美孕妇性xx| 朴麦妮原版视频高清资源 | 黄网在线免费看 | 五月婷影院 | 日本大胆人体视频 | 午夜精品久久久久久久久久 | 中文字幕一区二 | 国产黄片一区二区三区 | 日韩精品一二三区 | 99久久精品免费看国产交换 | 日韩大片在线 | 丰满少妇高潮久久三区 | 四虎最新域名 | www.插插| 麻豆视频在线观看免费网站 | 爱操在线 | 一本色道久久综合狠狠躁的推荐 | 欧美黄页网站 | 一级福利视频 | 久久五月综合 | 国产激情偷乱视频一区二区三区 | 人妻少妇无码精品视频区 | 中文在线资源天堂 | 九草视频在线观看 | 国产一区二区三区成人 | 欧美有码视频 | 日韩91在线 | 国产午夜视频在线播放 | 国产高潮视频在线观看 | 国产精品久久久久毛片大屁完整版 | 久久咪咪 | 三年中国片在线高清观看 | 制服诱惑一区二区 | 亚洲天堂2015 | 综合av网| 国产精品久久久久9999爆乳 | 热九九精品 | 欧美91av|